Жақында адамның әртүрлі жұқпалы ауруларын диагностикалаудың сенімді, жоғары сезімтал және жылдам әдісі жасалды. Бұл әдіс «ПТР талдау» деп аталады. Бұл не, оның мәні неде, ол қандай микроорганизмдерді аша алады және оны қалай дұрыс қабылдау керек, біз мақаламызда айтамыз.
Табу тарихы
Полимеразды тізбекті реакция (ПТР) әдісін 1983 жылы американдық ғалым Кэри Муллис ойлап тапты. Бастапқыда диагностикалық әдісті құрушысы жұмыс істеген Cetus корпорациясы патенттеген. Бірақ 1992 жылы барлық құқықтар мен патенттер Хоффман-Ла Рошқа сатылды. Осыдан кейін ұқсас зерттеулер қатар жүргізіліп, Алиса Чен, Дэвид Эдгар, Джон Трелл сияқты басқа американдық биологтар жазып алғаны белгілі болды. 1980 жылы бұл мәселемен кеңес ғалымдары А. Слюсаренко, А. Каледин, С. Городецкий де айналысты. Сондықтан жалғыз авторлық құқық иесін анықтау мүмкін болмады. Көптеген көрнекті биохимиктер полимеразды тізбекті реакция техникасының дамуына белгілі үлес қосты және өздерінің жаңалықтарын патенттеді. Қазіргі уақытта талдауПТР барлық жерде арнайы жабдықталған зертханаларда жүргізіледі.
ПТР диагностикалық әдісінің мәні
ПТР талдауы: бұл не және ол қалай жұмыс істейді? Әдістің мәні арнайы ДНҚ-полимераза ферментінің көмегімен жасанды жағдайда белгілі бір микробтық ортаның көлемін ұлғайту болып табылады. Ол үшін бар ДНҚ материалы бірнеше есе көбейтіледі. Осылайша, үлгіде патогенді микроорганизм болған жағдайда биохимиялық зертханалық манипуляциялардың арқасында оның мөлшері артады және микроскоппен бактерияны анықтау қиын болмайды.
Материалды зерттеу қалай жүргізіледі?
Талдау үшін қажет:
- ДНҚ матрицасы;
- материал бөлігінің ұштарын біріктіретін праймерлер;
- ыстыққа төзімді ДНҚ-полимераза ферменті;
- ферменттердің дұрыс жұмыс істеуін қамтамасыз ететін химиялық заттар;
- ДНҚ материалының өсуі мен дамуы үшін тиісті жағдай жасау үшін қажет буферлік ерітінді.
ПТР жүргізу үшін үш кезеңнен тұратын 25-30 қайталау орындалады: денатурация, жасыту және ұзарту.
Полимерлі тізбекті реакцияны талдау үшін арнайы құрылғы – күшейткіш қолданылады. Заманауи жабдық диагностика кезінде қателерді жою үшін құбырларды жылыту және салқындату үшін қажетті бағдарламаны орнатуға мүмкіндік береді.
Диагностика қайда қолданылады?
Полимерлі тізбекті реакция әдісі медицинаның әртүрлі салаларында қолданылады:
- қылмыскерлерол шаш, сілекей немесе қан сияқты генетикалық материалды анықтайды;
- ПТР қан сынағы генотиптеуге көмектеседі, мысалы, белгілі бір препаратқа жеке генетикалық тән реакцияны анықтауға;
- осы әдісті адамдар арасындағы туыстық байланыстарды анықтау үшін пайдалану;
- Түрлі жұқпалы ауруларды анықтау үшін медициналық диагностикада ең танымал ПТР әдісі болды.
ПТР қандай инфекцияларды анықтайды?
Сонымен, медицина ПТР талдауын ұзақ және сәтті қолданды. Бұл не, біз қазірдің өзінде білеміз. Ал онымен қандай қоздырғыштарды анықтауға болады? Келесі жұқпалы аурулар ПТР әдісімен анықталады:
- гепатит А, В, С;
- уреаплазмоз;
- кандидоз;
- хламидиоз;
- микоплазмоз;
- гарднереллез;
- инфекциялық мононуклеоз;
- трихомониаз;
- папилломавирусты инфекция;
- туберкулез;
- 1 және 2 типті герпес инфекциясы;
- геликобактериоз;
- цитомегаловирус;
- дифтерия;
- сальмонеллез;
- АИТВ инфекциясы.
Сонымен қатар қатерлі ісік диагностикасында ПТР әдістері қолданылады.
Әдістің артықшылықтары
ПТР диагностикасының бірнеше артықшылығы бар:
- Жоғары сезімталдық. Микроорганизм ДНҚ-ның бірнеше молекуласы болғанның өзінде ПТР талдауы инфекцияның болуын анықтайды. Бұл әдіс созылмалы және жасырын түрде пайда болатын ауруларға көмектеседі. Жиі мұндай жағдайларда микроорганизмәйтпесе өсіруге болмайды.
- Сілекей, қан, жыныс мүшелерінің секрециясы, шаш, эпителий жасушалары сияқты кез келген материал зерттеуге жарамды. Ең жиі кездесетіні – қан анализі және несеп-жыныс жағындысы ПТР үшін.
- Ұзақ мерзімді егін қажет емес. Автоматтандырылған диагностика процесі зерттеу нәтижелерін 4-5 сағаттан кейін алуға мүмкіндік береді.
- Әдіс 100% дерлік сенімді. Жалған теріс нәтижелердің жекелеген жағдайлары ғана тіркелді.
- Бір материал үлгісінен патогендердің бірнеше түрін анықтау мүмкіндігі. Бұл ауруды диагностикалау процесін тездетіп қана қоймайды, сонымен қатар материалдық шығындарды айтарлықтай азайтады. Көбінесе дәрігер кешенді ПТР талдауын тағайындайды. Алты қоздырғышты анықтаудан тұратын сараптама бағасы шамамен 1500 рубльді құрайды.
Талдауға дайындалу бойынша ұсыныстар
ПТР зерттеуі кезінде нәтижелер сенімді болуы үшін диагностикаға алдын ала дайындық бойынша ұсыныстарды сақтай отырып, сынақтан өту керек:
- Сілекей бермес бұрын сынама алудан 4 сағат бұрын тамақ ішуден және дәрі қабылдаудан бас тарту керек. Процедурадан бұрын ауызды қайнаған сумен шайыңыз.
- Жақсының ішкі бетінен сынама алу кезінде де жоғарыдағы ережелерді сақтау керек. Шаюдан кейін бездің секрециясын ерекшелеу үшін теріге жеңіл массаж жасау ұсынылады.
- Зәр әдетте үйде жиналады. Мұны істеу үшін мұқият дәретхананы жүргізу керекжыныс мүшелері. Стерильді пластик ыдысқа 50-60 мл зәрді жинаңыз. Материалдың тазалығын қамтамасыз ету үшін әйелдерге қынапқа тампон салу, ал ерлерге тері қатпарын мүмкіндігінше артқа тарту ұсынылады. Менструация кезінде донор болмаңыз.
- Сперманы беру үшін үлгі алудан 3 күн бұрын жыныстық қатынастан бас тарту керек. Дәрігерлер сонымен қатар саунаға бармауға және ыстық ваннаға баруға, алкоголь мен ащы тағамдарды ішуге кеңес береді. Сынақтан 3 сағат бұрын зәр шығарудан бас тарту керек.
- Несеп-жыныс жағындысын алу үшін, мысалы, хламидиозға ПТР сынағы жасалса, әйелдерге де, ерлерге де 3 күн бойы жыныстық демалыста болу ұсынылады. Антибактериалды препараттарды талдаудан 2 апта бұрын қабылдауға болмайды. Бір апта бойы интимдік гельдерді, жақпа майларды, вагинальды суппозиторийлерді, жуғыш заттарды қолдануды тоқтату керек. Зерттеуден 3 сағат бұрын зәр шығарудан бас тарту керек. Менструация кезінде сынама алынбайды, қан кетуді тоқтатқаннан кейін 3 күннен кейін несеп-жыныс жағындысын алуға болады.
Жүктілік кезіндегі ПТР
Баланы күту кезеңінде көптеген жыныстық жолмен берілетін инфекциялар ұрықтың қалыпты дамуы үшін өте қауіпті. ЖЖБИ құрсақішілік өсудің тежелуіне, түсік түсіруге немесе мерзімінен бұрын босануға, баланың туа біткен даму ақауларына әкелуі мүмкін. Сондықтан жүктіліктің ерте кезеңінде ПТР тексеруден өту өте маңызды. Тіркелу кезінде талдаудан өту керек - 12 аптаға дейін.
Материал жатыр мойны каналынан арнайы щетка арқылы алынады. Процедура ауыртпалықсыз және нәрестеге қауіп төндірмейді. Әдетте жүктілік кезінде ПТР әдісімен хламидиозға, сондай-ақ уреаплазмозға, микоплазмозға, цитомегаловирусқа, герпеске, папилломавирусқа талдау жүргізіледі. Мұндай зерттеулер кешені ПТР-6 деп аталады.
АИТВ диагностикасы үшін ПТР
Полимеразды тізбекті реакция әдісі ағзадағы өзгерістерге және диагноздың шарттарына өте сезімтал болғандықтан нәтижеге көптеген факторлар әсер етуі мүмкін. Сондықтан АИТВ инфекциясына ПТР талдауы сенімді әдіс емес, оның тиімділігі 96–98% құрайды. Қалған 2-4% жағдайда сынақ жалған оң нәтиже береді.
Бірақ кейбір жағдайларда АИВ-ПТР диагностикасы өте қажет. Ол әдетте жалған теріс ELISA нәтижесі бар адамдарға беріледі. Мұндай көрсеткіштер адамның вирусқа қарсы антиденелерді әлі дамытпағанын және олардың саны бірнеше есе артпастан анықталмайтынын көрсетеді. Дәл осыған ПТР қан анализін жүргізу арқылы қол жеткізуге болады.
Бұл диагностика АИВ жұқтырған анадан туған өмірінің бірінші жылындағы балаларға да қажет. Бұл әдіс баланың күйін сенімді анықтаудың жалғыз жолы.
Гепатитті диагностикалауға арналған ПТР
Полимеразды тізбекті реакция әдісі А, В, С гепатиті вирусының ДНҚ-сын инфекцияға антиденелер пайда болғанға дейін немесе ауру белгілері басталғанға дейін анықтауға мүмкіндік береді. С гепатиті үшін ПТР талдауы әсіресе тиімді, өйткені 85% жағдайда бұл ауру симптомсыз және симптомсыз өтеді.уақтылы емдеу созылмалы кезеңге өтеді.
Қоздырғышты уақтылы анықтау асқынуларды болдырмауға және ұзақ емдеуге көмектеседі.
ПТР кешенді зерттеу
Күрделі ПТР талдауы: бұл не? Бұл полимерлі тізбекті реакция әдісін қолданатын зерттеу, ол бір мезгілде инфекциялардың бірнеше түрін анықтауды қамтиды: mycoplasma genitalium, mycoplasma hominis, gardnerella vaginalis, candida, trichomonas, цитомегаловирус, ureaplasma urealiticum, 1 және 2 типті герпес, гономархевирустар, пап. Мұндай диагностиканың бағасы 2000-нан 3500 рубльге дейін. клиникаға, қолданылатын материалдар мен жабдықтарға, сондай-ақ талдау түріне байланысты: сапалық немесе сандық. Сіздің жағдайда не қажет - дәрігер шешеді. Кейбір жағдайларда патогеннің бар-жоғын анықтау жеткілікті, басқаларында, мысалы, АИТВ-инфекциясында сандық титр маңызды рөл атқарады. Жоғарыда аталған қоздырғыштардың барлығын диагностикалау кезінде тексеру «ПТР-12 талдауы» деп аталады.
Талдау нәтижелерінің транскрипті
ПТР талдауын шешу қиын емес. Көрсеткіштің тек 2 шкаласы бар – «оң нәтиже» және «теріс нәтиже». Патогенді анықтаған кезде дәрігерлер аурудың бар-жоғын 99% сенімділікпен растап, науқасты емдеуге кіріседі. Инфекцияны анықтаудың сандық әдісімен сәйкес бағанда анықталған бактериялардың сандық көрсеткіші көрсетіледі. Тек дәрігер аурудың дәрежесін анықтап, қажетті ем тағайындай алады.
Кейбір жағдайларда, мысалы, ПТР әдісімен АИТВ-инфекциясын анықтау кезінде теріс нәтиже бергенде алынған көрсеткіштерді растау үшін қосымша тексерулер жүргізу қажет болады.
Тестілеуді қайда тапсыру керек?
ПТР тестін қай жерде тапсыру керек: мемлекеттік емханада ма, әлде жеке зертханада ма? Өкінішке орай, қалалық медициналық мекемелерде құрал-жабдықтар мен әдістер жиі ескірген. Сондықтан заманауи құрал-жабдықтары бар, білікті мамандары бар жекеменшік зертханаларға басымдық берген дұрыс. Сонымен қатар, жеке клиникада нәтиже әлдеқайда жылдамырақ болады.
Мәскеуде көптеген жеке зертханалар әртүрлі инфекцияларға ПТР талдауын ұсынады. Мысалы, Vita, Complex Clinic, Happy Family, Uro-Pro, ПТР сынды емханаларда. Емтиханның бағасы 200 рубльден басталады. бір патогенді анықтау үшін.
Жұқпалы ауруларды ПТР арқылы диагностикалау көп жағдайда инфекцияның бастапқы кезеңдерінде ағзадағы патогенді анықтаудың жылдам және сенімді әдісі болып табылады деп қорытынды жасауға болады. Дегенмен, белгілі бір жағдайларда басқа диагностикалық әдістерді таңдаған жөн. Мұндай зерттеудің қажеттілігін тек маман ғана анықтай алады. ПТР талдауының шифрын шешу де кәсіби тәсілді қажет етеді. Дәрігердің кеңесін орындаңыз және қажет емес сынақтардан өтпеңіз.
