Бактерияларды зерттеудің адамдар үшін практикалық маңызы зор. Бүгінгі күні бір-бірінен патогенділігі, таралу аймағы, пішіні, мөлшері, жілікшелердің саны және басқа параметрлері бойынша ерекшеленетін көптеген прокариоттар ашылды. Бұл штаммды егжей-тегжейлі зерттеу үшін бактериологиялық зерттеу әдісі қолданылады.
Бактерия жасушаларын талдаудың қандай әдістері бар?
Бактериялардың патогенділігін анықтау үшін дақылды әртүрлі әдістермен зерттейді. Олардың ішінде:
1. Бактериоскопиялық әдіс.
2. Бактериологиялық әдіс.
3. Биологиялық әдіс.
Бактериоскопиялық және бактериологиялық зерттеу әдістері тікелей прокариоттық жасушалармен жұмыс істеуге негізделген, мұндай жасушалардың тәжірибелік жануарлардың тірі ағзасына әсерін зерттеу үшін биологиялық талдау қажет. Аурудың белгілі бір белгілерінің көріну дәрежесіне сәйкес ғалым жасай аладыүлгіде патогенді бактериялардың болуы немесе болмауы туралы қорытынды, сондай-ақ олардың культурасын алу және басқа жұмыстарда пайдалану үшін оларды жануардың ағзасында табиғи жолмен көбейту.
Зерттеудің бактериологиялық әдісі бактериоскопиялықтан ерекшеленеді. Біріншісінде талдау үшін тірі прокариоттардың арнайы дайындалған культурасы пайдаланылса, екіншісінде шыны слайдта өлі немесе тірі жасушалармен жұмыс жүргізіледі.
Бактериологиялық зерттеу әдісінің кезеңдері. Микробиология
Бактерия культурасының қасиеттерін зерттеу принципі прокариот жасушаларын зерттеу мақсатын қойған микробиологтар үшін де, міндеті бактериялардың патогенділігін немесе патогенді еместігін анықтау болып табылатын зертханашылар үшін де пайдалы болуы мүмкін. содан кейін науқасқа диагноз қойыңыз.
Бактерияларды зерттеу әдісі үш кезеңге бөлінеді:
1. Бастапқы үлгіден бактерияларды оқшаулау.
2. Бактерияларды себу және таза дақылды өсіру, оның қасиеттерін зерттеу.
3. Бактерия жасушаларын егжей-тегжейлі зерттеу.
Бірінші кезең
Үлгі немесе жағынды ортаның бос бетінен немесе емделушіден алынады. Осылайша, біз қоректік ортаға себу керек бактериялардың көптеген түрлерінің «коктейльін» аламыз. Кейде қажетті бактериялардың ағзадағы таралу ошақтарын біле отырып, оларды бірден бөліп алуға болады.
Екі-үш күннен кейін қажетті колониялар таңдалады жәнестерильді ілмек көмегімен Петри табақшаларының қатты қоректік ортасына себіледі. Көптеген зертханалар қатты немесе сұйық қоректік ортаны қамтуы мүмкін пробиркалармен жұмыс істейді. Микробиологиядағы зерттеудің бактериологиялық әдісі осылай жүзеге асады.
Екінші кезең
Бактериялардың жеке колонияларын алғаннан кейін тікелей макро- және микроанализ жүргізіледі. Колониялардың барлық параметрлері өлшенеді, олардың әрқайсысының түсі мен пішіні анықталады. Петри табақшасында, содан кейін бастапқы материалда колонияларды санау сирек емес. Бұл патогенді бактерияларды талдауда маңызды, олардың саны аурудың дәрежесіне байланысты.
Зерттеудің бактериологиялық әдісі, оның 2-ші кезеңі микроорганизмдердің жеке колонияларын зерттеу, бактерияларды талдаудың биологиялық әдісімен байланыстыруға болады. Бұл кезеңде жұмыс істеудің тағы бір мақсаты – бастапқы материалдың көлемін арттыру. Мұны қоректік ортада жасауға болады немесе тірі эксперименттік организмдерге in vivo эксперимент жүргізуге болады. Патогендік бактериялар көбейеді, нәтижесінде қанда миллиондаған прокариоттық жасушалар болады. Алынған қаннан бактериялардың қажетті жұмыс материалын дайындау оңай.
Үшінші кезең
Зерттеудің ең маңызды бөлігі – бактерия дақылының морфологиялық, биохимиялық, токсигендік және антигендік қасиеттерін анықтау. Жұмыс қоректік ортада алдын ала тазартылған дақылдармен, сондай-ақ микроскоп астында препараттармен (жиі боялған) жүргізіледі.
Меншік құқығын орнатупатогенді немесе шартты-патогенді бактерияларды сол немесе басқа жүйелі топқа, сондай-ақ олардың дәрілік заттарға төзімділігін анықтауға бактериологиялық зерттеу әдісін жүргізуге мүмкіндік береді. 3-кезең – антибиотиктер, яғни қоршаған ортадағы дәрілік заттардың құрамы жағдайында бактерия жасушаларының мінез-құлқын талдау.
Дақылдың антибиотиктерге төзімділігін зерттеу нақты науқасқа қажетті, ең бастысы тиімді препараттарды тағайындау қажет болғанда үлкен практикалық маңызы бар. Бұл жерде бактериологиялық зерттеу әдісі көмектеседі.
Өсу ортасы дегеніміз не?
Даму және көбею үшін бактериялар алдын ала дайындалған қоректік ортада болуы керек. Консистенциясы бойынша олар сұйық немесе қатты, ал шығу тегі бойынша өсімдік немесе жануар болуы мүмкін.
Негізгі медиа талаптары:
1. Стерильділік.
2. Максималды мөлдірлік.
3. Қышқылдықтың, осмостық қысымның, судың белсенділігінің және басқа биологиялық мәндердің оңтайлы көрсеткіштері.
Оқшауланған колонияларды алу
1. Дригалский әдісі. Бұл бактериялық ілмекке әртүрлі микроорганизмдер бар жағынды қолдану фактісінен тұрады. Бұл ілмек қоректік ортасы бар бірінші Петри табақшасының бойымен өтеді. Әрі қарай, ілмекті өзгертпей, қалдық материал әдісі екінші және үшінші Петри табақшаларында жүзеге асырылады. Осылайша, колонияның соңғы үлгілерінде бактериялар тым тығыз егілмейді, осылайша жұмысқа қажеттілерді табу мүмкіндігін жеңілдетеді.бактериялар.
2. Кох әдісі. Ол балқытылған қоректік ортасы бар пробиркаларды пайдаланады. Онда бактериялар жағылған ілмек немесе пипетка қойылады, содан кейін пробирканың ішіндегісі арнайы пластинаға құйылады. Агар (немесе желатин) біраз уақыттан кейін қатып қалады және оның қалыңдығынан қажетті жасуша колонияларын табу оңай. Микроорганизмдердің концентрациясы тым жоғары болмауы үшін пробиркалардағы бактериялар қоспасын жұмысқа кіріспес бұрын сұйылту маңызды.
Зерттеудің бактериологиялық әдісі, оның кезеңдері бактериялардың қажетті мәдениетін бөліп алуға негізделген, оқшауланған колонияларды табудың осы екі әдісінсіз мүмкін емес.
Антибиограмма
Көрнекі түрде бактериялардың дәрілерге реакциясын екі практикалық жолмен көруге болады:
1. Қағаз дискі әдісі.
2. Бактериялар мен антибиотикті сұйық ортада өсіру.
Қағаз дискі әдісі қатты қоректік ортада өсірілген микроорганизмдер культурасын қажет етеді. Мұндай қоректік ортаға антибиотиктерге малынған дөңгелектелген қағаздың бірнеше бөлігін салады. Егер препарат бактериялық жасушаларды бейтараптандыруды сәтті жеңсе, мұндай емдеуден кейін колониялардан айырылған аймақ пайда болады. Антибиотикке реакция теріс болса, бактериялар аман қалады.
Сұйық қоректік ортаны пайдаланған жағдайда, алдымен әртүрлі сұйылтылған бактериялар культурасы бар бірнеше пробиркаларды дайындаңыз. Бұл пробиркаларға антибиотиктер қосылады, зат пен микроорганизмдердің өзара әрекеттесу процесі тәулік ішінде байқалады. Нәтижесінде жоғары сапалы антибиограмма алынады, оған сәйкес мүмкін боладыберілген дақыл үшін препараттың тиімділігін бағалаңыз.
Талдаудың негізгі міндеттері
Мұнда бактериологиялық зерттеу әдісінің мақсаттары мен кезеңдері берілген.
1. Бактериялық колонияларды оқшаулау үшін қолданылатын бастапқы материалды алыңыз. Бұл кез келген заттың бетінен, шырышты қабықшадан немесе адам ағзасының қуысынан алынған жағынды, қан анализі болуы мүмкін.
2. Қатты қоректік ортада дақылды өсіру. 24-48 сағаттан кейін Петри табақшасында әртүрлі типтегі бактериялардың колонияларын табуға болады. Біз морфологиялық және/немесе биохимиялық критерийлерге сәйкес қажеттісін таңдаймыз және онымен әрі қарай жұмыс жасаймыз.
3. Алынған мәдениетті тарату. Бактериологиялық зерттеу әдісі бактериалды дақылдардың санын көбейтудің механикалық немесе биологиялық әдісіне негізделуі мүмкін. Бірінші жағдайда жұмыс қатты немесе сұйық қоректік орталармен жүргізіледі, олардың үстінде бактериялар термостатта көбейіп, жаңа колониялар түзеді. Биологиялық әдіс бактериялар санын көбейту үшін табиғи жағдайларды қажет етеді, сондықтан бұл жерде тәжірибелік жануар микроорганизмдермен ауырады. Бірнеше күннен кейін қан сынамасынан немесе жағындысынан көптеген прокариоттарды табуға болады.
4. Тазартылған мәдениетпен жұмыс істеу. Бактериялардың жүйелі орналасуын, сондай-ақ олардың қоздырғыштарға жататындығын анықтау үшін морфологиялық және биохимиялық белгілері бойынша жасушаларға мұқият талдау жүргізу қажет. Микроорганизмдердің патогендік топтарын зерттегенде білу маңыздыантибиотиктер қаншалықты тиімді.
Бұл бактериологиялық зерттеу әдісінің жалпы сипаттамасы болды.
Талдау мүмкіндіктері
Бактериологиялық зерттеудің негізгі ережесі – максималды стерильділік. Пробиркалармен жұмыс жасасаңыз, бактериялардың культуралары мен субкультуралары тек қыздырылған спирт шамы арқылы жүзеге асырылуы керек.
Бактериологиялық зерттеу әдісінің барлық кезеңдері арнайы ілмекті немесе Пастер пипеткасын қолдануды талап етеді. Екі құралды спирт шамының жалынында алдын ала өңдеу керек. Пастер тамшуырына келетін болсақ, бұл жерде термиялық зарарсыздандыру алдында пипетканың ұшын пинцетпен үзу керек.
Бактерияларды себу техникасының да өзіндік ерекшеліктері бар. Біріншіден, қатты қоректік ортаға егу кезінде агардың бетінен бактериялық ілмек өткізіледі. Цикл, әрине, бетінде микроорганизмдердің үлгісі болуы керек. Қоректік ортаға егу де қолданылады, бұл жағдайда ілмек немесе тамшуыр Петри табақшасының түбіне жетуі керек.
Сұйық ортамен жұмыс істегенде пробиркалар қолданылады. Бұл жерде сұйықтықтардың зертханалық шыны ыдыстардың немесе тығындардың шеттеріне тиіп кетпеуін, ал қолданылатын құралдардың (тамшуыр, ілмек) бөгде заттар мен беттерге тиіп кетпеуін қадағалау маңызды.
Биологиялық зерттеу әдісінің маңыздылығы
Бактерия үлгілерін талдаудың практикалық қолданулары бар. Ең алдыменбактериологиялық зерттеу әдісін медицинада қолдануға болады. Мысалы, дұрыс диагноз қою үшін, сондай-ақ емдеудің дұрыс курсын әзірлеу үшін науқастың микрофлорасын зерттеу қажет. Бұл жерде патогенге қарсы препараттардың белсенділігін көрсететін антибиограмма көмектеседі.
Бактерияларды талдау зертханада туберкулез, қайталанатын қызба немесе гонорея сияқты қауіпті ауруларды анықтау үшін қолданылады. Ол сондай-ақ бадамша бездердің, мүше қуыстарының бактериялық құрамын зерттеу үшін қолданылады.
Қоршаған ортаның ластануын анықтау үшін бактериологиялық зерттеу әдісін қолдануға болады. Объектінің бетінен алынған жағындының сандық және сапалық құрамы туралы мәліметтерге сәйкес осы ортаның микроорганизмдер бойынша популяция дәрежесі анықталады.
