С гепатиті – бір немесе бірнеше РНҚ молекуласынан тұратын Flaviviridae HCV вирусынан туындаған бауыр инфекциясы. Әдетте, науқаста С гепатитін анықтау үшін бірқатар диагностикалық шаралар қабылданады. ПТР диагнозды дәл растайтын талдау болып табылады. Науқаста аурудың алғашқы белгілері болған кезде жиі дәрігерлер қорытынды жасайды.
С гепатиті дегеніміз не
Бауырдың қан немесе жыныстық қатынас арқылы берілетін вирустық инфекциямен зақымдануы медицинада С гепатиті деп аталады. Қоздырғышы - Flaviviridae тұқымдасының жасушалық емес инфекциялық қоздырғыштарының РНҚ-сы бар вирусы. Инфекция денеде ұзақ уақыт бойы өзін көрсетпей қалуы мүмкін. Сондықтан, ПТР РНҚ-РНҚ көмегімен қан сынағы арқылы микроорганизм анықталғанда ғана, С гепатиті (диагноз ретінде) негізделген деп саналады.
Флавивирус жасанды түрде өсірілген оқшауланған жасушаларда өндірілмейді. Көбею процесінде инфекция қоздырғышы иммунологиялық айқын модификацияларды жасайды. Бұл факторлар дененің беруге кедергі келтіредітиісті қорғаныс реакциясы және сарапшылар тиімді вакцинаны жасауда қиындықтарға тап болуда.
Вирус парентеральды жолмен беріледі. Инфекция үшін ол жеткілікті мөлшерде тікелей қанға енуі керек.
С гепатиті үшін қандай сынақтар жасалады
Бауырдың вирустық патологиялары зертханалық зерттеулер арқылы анықталады. С гепатитінің клиникалық зерттеулері пациенттің биоматериалындағы, негізінен қандағы бөгде және қауіпті антигендер немесе ақуыз қосылыстарын (антиденелер) зерттеу арқылы жүзеге асырылады.
- Ферменттік иммундық талдау (ИФА). Әдіс қандағы lgM антиденелерін анықтауға негізделген. Иммуноглобулин ең үлкен болып саналады және пентамер болып табылады. Ол лимфоциттердің белгісіз бөгде затқа бірінші реттік қорғаныс реакциясында көрінеді.
- Радиоиммундық талдау (RIA) - йодтың белгіленген радиоактивті изотопын пайдаланып lgM иммуноглобулинін сандық анықтау.
- С гепатитінің ПТР – биоматериалда (қанда) вирустық РНҚ анықтау. Бұл талдау диагнозды сенімді түрде растайды.
IgG сынағы сенімді емес. Оның қан сарысуында болуы флавивирустың ғана емес, сонымен қатар сол қоздырғышы бар басқа өткен инфекцияның болуын да көрсете алады.
ПТР талдауын не анықтайды
Полимеразды тізбекті реакция (ПТР) зерттеуге арналған материал үлгілеріндегі (эпителий, қан) белгілі бір патогендерге тән ДНҚ аймақтарын анықтауға негізделген. Талдау биологиялық материалдағы РНҚ немесе ДНҚ анықтау арқылы патогенді ең кішкентай ағзаларды (вирустар) анықтауға мүмкіндік береді.
Антиденелерді анықтаудың зертханалық процедурасы С гепатиті ПТР 3 кезеңде жүргізіледі:
- Таңдау. Зерттелетін биоматериал қоспалардан тазартылады және хроматографиялық колоннаның жылжымалы фазасында ДНҚ алынады.
- Күшейту. Талдау құрылғы-термостат циклінде жүргізіледі. Ол пробиркаларды белгілі бір циклдікпен қыздырады және суытады. Бір зерттеу үшін 35 циклге дейін орындалады. Нәтиже – қоздырғышты анықтау, анықтау және бағалау үшін ДНҚ фрагменттерінің жеткілікті саны.
- Электрофорез. Алынған фрагменттерді агарозаның әртүрлі қанығуы бар гельге салып, электрофорез жүргізеді. Алынған электроферограмма компьютерде талданады.
Стандартты ПТР зерттеуі ғана емес, сонымен қатар нақты уақыттағы ПТР талдауы да қолданылады. Бұл нақты уақыт диагностикасы. Әдіс аурудың қалыптасуы мен динамикасын анықтауға, сондай-ақ патологияның пайда болу себебін жоюға бағытталған терапияны тағайындауға мүмкіндік беретін сапалық және сандық талдауға мүмкіндік береді. Нақты уақыттағы ПТР инфекция қоздырғыштарының таза мәдениетін анықтау үшін де қолданылады (генотиптеу).
Полимеразды тізбекті реакция сынағы қалай жасалады
Диагностика үшін адамның кез келген биологиялық сұйықтығын қолдануға болады. С гепатитін анықтауға арналған биоматериал әдетте қан болып табылады.
Диагностика үшін сынама алу процедуралық түрде жүзеге асырыладыкеңсе. Қан алу үшін қанның ұюын тежейтін заты бар бір реттік пробиркаларды пайдаланыңыз. Инфекциялық қоздырғыштардың таралуын болдырмауға бағытталған іс-шаралар сырттан микроорганизмдердің басқа штаммының енуін болдырмауға көмектеседі.
С гепатитінің ПТР-ға қан таңертең аш қарынға алынады. Сынама дереу зертханаға жіберіледі. Биоматериалды +4-тен +8 градус Цельсий температурасында сақтауға рұқсат етіледі. Контейнерлер таңбаланған және нұсқаулармен қамтамасыз етілген. Сынақ нәтижелері 48 сағат ішінде, кейде ертерек қолжетімді болады.
ПТР түрлері
Полимеразды тізбекті реакцияның қолдану аясы өте кең. Инфекционистер В гепатитін, қансорғыш жәндіктермен берілетін ауруларды, СПИД, туберкулезді қолдану арқылы анықтайды. Онкологияда бұл әдісті қолдану арқылы ісік жасушалары ерте кезеңде анықталады.
Талдаудың он төртке жуық түрі бар. Бір немесе басқа түрді пайдалану талдаулардың көлемі мен соңғы нәтижелеріне байланысты. Нәтиже 20 минут ішінде қажет болған жағдайда ПТР кейбір түрлері өте қажет.
С гепатитін диагностикалау үшін полимеразды тізбекті реакцияның 3 түрі қолданылады:
- Сапалық бағалау ағзада инфекцияның бар екенін көрсететін оң немесе флавивирустың жоқтығын көрсететін теріс болуы мүмкін.
- Нақты уақыттағы ПТР (сандық талдау) - патогеннің сандық РНҚ-сын ХБ/мл анықтайды.
- Генотиптеу – вирустың түрін (генотипін) ашатын талдау.
Ауруды дәл анықтау және анықтау үшін, содан кейінзерттеулердің үш түрі де оңтайлы терапияны тағайындау үшін қолданылады.
Сапалы полимеразды тізбекті реакция талдауы
ИФА бар және HCV антиденелерін анықтаған әрбір адам үшін талдау міндетті болып табылады. С гепатиті үшін сапалы ПТР стандартты сезімталдық сынағы болып табылады. Әдіс тек анықтауға бағытталған, басқа заттарды санау немесе оқшаулау жүргізілмейді.
Антиденелерді анықтау үшін сезімталдық шегі кемінде 50 ХБ/мл болатын арнайы сынақ жүйелері қолданылады. Егер антиденелер анықталса, басқа нақтылау сынақтары тағайындалады. Нәтиже теріс болса, басқа сынақ жүргізілмейді.
Кейбір жағдайларда жалған теріс нәтиже зертхананың білікті емес қызметкерлеріне немесе сапасыз реагенттерге байланысты болуы мүмкін. Сақтандыру үшін талдауды басқа жерде қайта жасаған дұрыс.
Сандық ПТР
Әдіс бір реакция цикліндегі флавивирус санын тікелей зерттеу үшін қолданылады. Дәл өлшеу үшін будандастыру үшін пайдаланылатын ДНҚ фрагменттері немесе флуоресцентті таңбаланған праймерлер қолданылады. SYBL Green бояуын қолданатын үнемді анықтау мүмкіндігі бар. Бояғыш ДНҚ-дағы кішкене ойыққа сыналады және лазермен сәулелендіргенде көк түске айналады.
Концентрация сандық эквиваленттегі күшейткіш-аппарат арқылы анықталады. Мәндер зертханалар арасында аздап өзгеруі мүмкін, сондықтан оларды анықтамалық мәндермен салыстыру керек.
Сандық ПТРС гепатиті препараттардың оңтайлы дозасын таңдауға және терапияның ұзақтығын анықтауға көмектеседі. Зерттеудің жиілігі аурудың сатысына, генотип түріне және тағайындалған емдеу курсына байланысты.
Генотипті анықтау
Гепатит С вирусының генетикалық құрылымы өзгермелі. Көптеген модификациялар вакцинаны жасауды мүмкін емес етеді, сонымен қатар терапияны қиындатады. Барлығы 11 генотип пен 100 субтип анықталып, тіркелді. Бұрынғы КСРО елдерінде С гепатитін жұқтырған адамдарда ПТР негізінен 1b және 3 генотиптерін анықтайды.
Генотиптердің кез келгені болса, цирроз немесе бауыр ісігі көңіл көтеруі мүмкін. Сондықтан вирусты дер кезінде анықтау өте маңызды.
Кейбір емделушілер үшін HCV-мен күресуге арналған кейбір препараттар улы болып табылады. Генотиптеу белок түрін анықтауға және тиімді препаратты тағайындауға мүмкіндік береді.
Типтеу сынақтарының нәтижелерінде вирустың генотипін көрсететін кіші латын әрпі бар сан бар. Егер HCV анықталса, бірақ терілмесе, бұл адамның белгілі бір географиялық аймаққа тән емес генотипі бар екенін білдіреді.
Талдау нәтижелері
Дәрігер нәтижелерді шешумен айналысады. Бірнеше зерттеулерден алынған деректер ғана (анамнез және зерттеумен бірге) ауру тарихының жалпы нақты бейнесін бере алады.
- Дені сау адамда биоматериалдағы сапалы реакцияға тест ештеңені анықтамайды. Егер «анықталды» мәні көрсетілсе, инфекция расталады және науқасқосымша диагностикадан кейін емдеу қажет.
- Инфекция қоздырғыштарының санын анықтау ағзаға вирустық жүктемені бағалауға мүмкіндік береді. Әдетте, С гепатиті сандық ПТР патогенді анықтамайды. 810^5 дейінгі көрсеткіш төмен жүктеме ретінде қарастырылады және дұрыс терапиямен қолайлы нәтижеге кепілдік береді. Жоғары мәндер терең тексеруді және ұзақ мерзімді терапияны анықтауды талап етеді, оның оң нәтижесіне ешкім кепілдік бере алмайды.
- Оң генотиптеу нәтижелері қай генотиптің танылғанын көрсетеді. Теріс нәтиже флавивирустың жоқтығын немесе осы аймаққа тән емес генотиптің болуын көрсетеді.
ПТР оң сынағы нені көрсетеді
Кез келген ауыр ауру жан-жақты диагностиканы қажет етеді. С гепатиті ПТР оң көрсеткіші диагнозды растайды, бірақ болжамды қосымша зертханалық және аспаптық зерттеулерден кейін ғана жасауға болады.
Вирусты анықтау патологияның толық көрінісін бермейді. Оның түрі мен сипатын анықтау, оның бауырға және басқа мүшелерге қалай әсер ететінін анықтау қажет. HCV-ны ерте анықтау көбінесе қолайлы емдік нәтиже береді.
ИФА оң болатын теріс ПТР
Бауырдың зақымдалуына тән белгілерді байқаған кезде инфекцияның ағзаға енуінің ықтималдығы жоғары. Сондықтан сіз гепатологпен немесе жұқпалы аурулар бойынша маманмен байланысуыңыз керек. Әңгімелесу кезінде маман анамнез жинап, қажетті сараптаманы тағайындайды.
ЕгерС гепатиті бойынша ПТР зерттеулерінің нәтижелері теріс, ал иммуноферменттік талдау оң, бұл қандағы флавивирусқа антиденелердің болуын көрсетеді. Бұл әдетте инфекция ағзаға аз мөлшерде түскенде болады, сондықтан иммундық жүйе оны өздігінен жеңді. Бірақ мұндай адамдар әлі де жұқтырған деп саналады және әр 6 ай сайын тексерілу керек. Егер мұндай сынақ нәтижелерімен адам тегін медициналық тексеруден бас тартылса, денсаулығын сақтау үшін ақылы түрде ПТР жүргізген дұрыс, ал нәтиже оң болса, диагностика мен емдеу үшін маманға хабарласыңыз.
Әдістің артықшылықтары мен кемшіліктері
С гепатиті диагнозын қойғанда ПТР бірнеше артықшылықтарға ие:
- Қоздырғышты ерте анықтау.
- Вирустың дәл анықтамасы.
- Диагностиканың тиімділігі.
- Ең төменгі қате деңгейі.
- Жоғары сезімталдық.
Әдістің кемшіліктері:
- Талдаудың жоғары құны. Сынақ қымбат тұратын жабдықты, реагенттерді және жоғары білікті медициналық қызметкерлерді қажет етеді. Барлығы қосылып айтарлықтай соманы құрайды.
- Биоматериалды тасымалдауға қойылатын қатаң талаптар.
Бауырдың қабынуын емдеу
С гепатиті вирусына арналған ПТР талдауы диагноздың негізі болып саналады, бірақ түпкілікті емес. Терапияның тиімді болуы үшін бірқатар қосымша зертханалық және аспаптық зерттеулер қажет. Барлығын өткеннен кейіндәрігер емдеуді тағайындайтын диагностикалық шаралар:
- №5 диета тағайындалады.
- Алкоголь толығымен алынып тасталды.
- Интерферон мен Рибавиринді 25 күн бойы бірге қабылдау.
- «Эссенциале», «Карсил», «Фосфоглив» гепатротекторларының курстары.
- Ерекше жағдайларда дискретті плазмаферез қолданылады.
Гепатолог тағайындаған дәрілер дозасын өзгертпей, үнемі қолданылады. Препараттарды қабылдау ұзақтығын бақылау сынақтарынан өткеннен кейін дәрігер анықтайды. Терапия курсын аяқтағаннан кейін алты ай сайын дәрігерге бару керек.
ПТР-диагностикасы С гепатитінің қоздырғышын ерте кезеңде анықтауға мүмкіндік береді. Бұл терапияның тиімділігіне және аурудың цирроз және гепатоцеллюлярлық карцинома сияқты қауіпті түрлерге ауысуының алдын алуға ықпал етеді.
