Барлық дерлік жұқпалы аурулардың зертханалық диагностикасы науқастың қанындағы қоздырғыштың антигендеріне қарсы түзілетін антиденелерді серологиялық реакция әдістерімен анықтауға негізделген. Олар медициналық тәжірибеге ХІХ ғасырдың аяғынан ХХ ғасырдың басына дейін кірді.
Ғылымның дамуы микробтардың антигендік құрылымын және олардың токсиндерінің химиялық формулаларын анықтауға көмектесті. Бұл тек емдік емес, диагностикалық сарысулар жасауға мүмкіндік берді. Оларды зертханалық жануарларға әлсіретілген қоздырғыштарды енгізу арқылы алады. Бірнеше күн әсер еткеннен кейін қояндардың немесе тышқандардың қаны микробтарды немесе олардың токсиндерін серологиялық сынақтар арқылы анықтау үшін қолданылатын препараттарды дайындау үшін пайдаланылады.
Мұндай реакцияның сыртқы көрінісі оның қалыптасу жағдайларына және науқастың қанындағы антигендердің күйіне байланысты. Егер микробтық бөлшектер ерімейтін болса, олар сарысуда тұнбаға түседі, лизиске ұшырайды, байланысады немесе қозғалмайды. Егер антигендер еритін болса, онда бейтараптандыру немесе преципитация құбылысы пайда болады.
Агглютинация реакциясы (РА)
Серологиялық агглютинация сынағы өте ерекше. Орындау оңай және жеткіліктівизуалды, науқастың қан сарысуында антигендердің болуын жылдам анықтау. Ол Видаль реакциясын (іш сүзегі мен паратифті диагностикалау) және Вейгльді (бөртпе сүзегі) тексеру үшін қолданылады.
Ол адамның антиденелері (немесе агглютининдер) мен микробтық жасушалар (аглютеногендер) арасындағы белгілі бір әрекеттесуге негізделген. Олардың әрекеттесуінен кейін тұнбаға түсетін бөлшектер пайда болады. Бұл оң белгі. Реакцияны орнату үшін тірі немесе өлі микроб агенттері, саңырауқұлақтар, қарапайымдылар, қан жасушалары және соматикалық жасушалар пайдаланылуы мүмкін.
Химиялық тұрғыдан реакция екі кезеңге бөлінеді:
- Антиденелердің (АТ) антигендермен (AG) спецификалық байланысы.
- Спецификалық емес – AG-AT конгломераттарының тұнбасы, яғни агглютинаттың түзілуі.
Жана емес агглютинация реакциясы (IPHA)
Бұл реакция алдыңғыға қарағанда сезімталырақ. Ол бактериялар, жасушаішілік паразиттер және қарапайымдылар тудыратын ауруларды диагностикалау үшін қолданылады. Оның спецификалық екені сонша, антиденелердің өте төмен концентрациясын да анықтауға болады.
Тазартылған қой эритроциттері және антиденелермен немесе антигендермен алдын ала өңделген адамның эритроциттері оны өндіру үшін пайдаланылады (зертханашы не тапқысы келетініне байланысты). Кейбір жағдайларда адамның қызыл қан жасушалары иммуноглобулиндермен өңделеді. Эритроциттердің серологиялық реакциялары, егер олар түтік түбіне шөгіп қалса, өтті деп есептеледі. Оң реакция туралыжасушалардың бүкіл түбін алып жатқан төңкерілген қолшатыр түрінде орналасқанын айтыңыз. Теріс реакция деп саналады, егер эритроциттер бағанға немесе төменгі жақтың ортасында түйме түрінде орналасса.
Төгу реакциясы (RP)
Осы түрдегі серологиялық реакциялар антигендердің өте ұсақ бөлшектерін анықтау үшін қолданылады. Бұл, мысалы, белоктар (немесе олардың бөліктері), ақуыздардың липидтермен немесе көмірсулармен қосылыстары, бактериялардың бөліктері, олардың токсиндері болуы мүмкін.
Реакцияға арналған сарысулар жануарларды, әдетте қояндарды жасанды түрде жұқтыру арқылы алынады. Бұл әдіс арқылы сіз кез келген тұндырғыш сарысуды ала аласыз. Серологиялық преципитация реакцияларының орнығуы әсер ету механизмі бойынша агглютинация реакцияларына ұқсас. Қан сарысуындағы антиденелер коллоидты ерітіндідегі антигендермен қосылып, түтік түбіне немесе субстратқа (гель) шөгетін үлкен белок молекулаларын түзеді. Бұл әдіс өте спецификалық болып саналады және заттың шамалы мөлшерін де анықтай алады.
Оба, туляремия, күйдіргі, менингит және басқа ауруларды диагностикалау үшін қолданылады. Сонымен қатар, ол сот-медициналық сараптамаға тартылған.
Гельді тұндыру реакциясы
Серологиялық реакцияларды тек сұйық ортада емес, агар гелінде де жүргізуге болады. Бұл диффузиялық жауын-шашын әдісі деп аталады. Оның көмегімен күрделі антигендік қоспалардың құрамы зерттеледі. Бұл әдіс антигендердің антиденелерге және керісінше химотаксиске негізделген. Гельде олар қозғаладыбір-біріне әр түрлі жылдамдықпен келіп, кездесіп, жауын-шашын сызықтарын құрайды. Әрбір жол бір AG-AT жинағы.
Антитоксинмен (PH) экзотоксинді бейтараптандыру реакциясы
Антиуытты сарысулар микроорганизмдер шығаратын экзотоксиннің әсерін бейтараптандыруға қабілетті. Бұл серологиялық реакциялар осыған негізделген. Микробиология бұл әдісті сарысуларды, токсиндерді және токсоидтарды титрлеу және олардың емдік белсенділігін анықтау үшін пайдаланады. Токсинді бейтараптандыру күші әдеттегі бірліктермен анықталады - AE.
Сонымен қатар, осы реакцияның арқасында экзотоксиннің түрін немесе түрін анықтауға болады. Бұл сіреспе, дифтерия, ботулизм диагнозында қолданылады. Зерттеуді «әйнек үстінде» де, гельде де жүргізуге болады.
Лизис реакциясы (RL)
Науқас ағзасына енетін иммундық сарысудың негізгі қызметі пассивті иммунитеттен басқа, лизингтік қасиетке де ие. Ол науқастың денесіне енетін микробтық агенттерді, жасушалық бөтен элементтерді және вирустарды ерітуге қабілетті. Қан сарысуына кіретін антиденелердің ерекшелігіне қарай бактериолизиндер, цитолизиндер, спирохетолизиндер, гемолизиндер және т.б. бөлінеді.
Бұл спецификалық антиденелер «комплемент» деп аталады. Ол адам ағзасының барлық дерлік сұйықтықтарында кездеседі, күрделі ақуыздық құрылымға ие және температураның көтерілуіне, шайқауға, қышқылдарға және тікелей күн сәулелеріне өте сезімтал. Бірақ кептірілген күйде ол сақтауға қабілеттіоның лизистік қасиеттері алты айға дейін.
Осы түрдегі серологиялық реакциялардың келесі түрлері бар:
- бактериолиз;
- гемолиз.
Бактериолиз науқастың қан сарысуын және тірі микробтары бар арнайы иммундық сарысуды қолдану арқылы жүзеге асырылады. Қанда жеткілікті комплемент болса, зерттеуші бактериялардың лизисін көреді және реакция оң деп есептеледі.
Қанның екінші серологиялық реакциясы науқастың қызыл қан жасушаларының суспензиясы белгілі бір комплимент болған кезде ғана белсендірілетін гемолизиндері бар сарысумен өңделеді. Егер бар болса, зертханашы қызыл қан жасушаларының еруін бақылайды. Бұл реакция қазіргі медицинада қан сарысуындағы комплемент титрін (яғни оның эритроциттердің лизисін қоздыратын ең аз мөлшерін) анықтау және комплемент бекітуге талдау жасау үшін кеңінен қолданылады. Дәл осылайша мерезге серологиялық сынама – Вассерман реакциясы жүргізіледі.
Комплемент бекіту реакциясы (CFR)
Бұл реакция науқастың қан сарысуындағы инфекция қоздырғышына антиденелерді анықтау үшін, сондай-ақ оның антигендік құрылымы бойынша патогенді анықтау үшін қолданылады.
Осы уақытқа дейін біз қарапайым серологиялық реакцияларды сипаттадық. РСК күрделі реакция болып саналады, өйткені онда екі емес, үш элемент өзара әрекеттеседі: антидене, антиген және комплемент. Оның мәні антидене мен антигеннің өзара әрекеттесуінде жатыртүзілген AG-AT кешенінің бетінде адсорбцияланатын комплемент белоктарының қатысуымен ғана болады.
Антигендердің өздері комплемент қосқаннан кейін реакцияның сапасын көрсететін елеулі өзгерістерге ұшырайды. Бұл лизис, гемолиз, иммобилизация, бактерицидтік немесе бактериостатикалық әрекет болуы мүмкін.
Реакцияның өзі екі фазада жүреді:
- Емтихан алушыға көзбен көрінбейтін антиген-антидене кешенінің түзілуі.
- Комплемент әсерінен антигеннің өзгеруі. Бұл кезеңді көбінесе жалаңаш көзбен байқауға болады. Егер реакция көзбен көрінбесе, өзгерістерді анықтау үшін қосымша индикатор жүйесі пайдаланылады.
Индикатор жүйесі
Бұл реакция комплементті бекітуге негізделген. Тазартылған қошқар эритроциттері мен комплементсіз гемолитикалық сарысуды пробиркаға РСК орнатылғаннан кейін бір сағаттан кейін қосады. Егер пробиркада байланыспаған комплемент қалса, онда ол қойдың қан жасушалары мен гемолизин арасында түзілген АГ-АТ комплексіне қосылып, олардың еруіне әкеледі. Бұл RSK теріс екенін білдіреді. Егер эритроциттер бұзылмаған болса, сәйкесінше реакция оң болады.
Гемагглютинация сынағы (RGA)
Бір-бірінен түбегейлі екі түрлі гемагглютинация реакциясы бар. Олардың бірі серологиялық, ол қан топтарын анықтау үшін қолданылады. Бұл жағдайда қызыл қан жасушалары антиденелермен әрекеттеседі.
Ал екіншісіреакция серологиялықға жатпайды, өйткені қызыл қан жасушалары вирустар өндіретін гемагглютининдермен әрекеттеседі. Әрбір қоздырғыш тек белгілі бір эритроциттерге (тауық, қой еті, маймыл) әсер ететіндіктен, бұл реакцияны өте ерекше деп санауға болады.
Сынақ түтігінің түбіндегі қан жасушаларының орналасуына қарап реакцияның оң немесе теріс екенін білуге болады. Егер олардың үлгісі төңкерілген қолшатырға ұқсайтын болса, онда науқастың қанында қажетті вирус бар. Ал егер барлық эритроциттер тиын бағанасы тәрізді түзілген болса, онда қажетті қоздырғыштар жоқ.
Гемагглютинацияны тежеу сынағы (HITA)
Бұл пациенттің қан сарысуында вирустардың түрін, түрін немесе арнайы антиденелердің болуын анықтауға мүмкіндік беретін жоғары спецификалық реакция.
Оның мәні зерттелетін материалы бар пробиркаға қосылған антиденелер антигендердің эритроциттерге түсуіне жол бермейді, осылайша гемагглютинацияны тоқтатады. Бұл ізделіп жатқан спецификалық вирустың қанында арнайы антигендердің болуының сапалы белгісі.
Иммунофлуоресценция реакциясы (RIF)
Реакция AG-AT кешендерін фторхромды бояғыштармен өңдегеннен кейін флуоресцентті микроскоппен анықтау мүмкіндігіне негізделген. Бұл әдісті өңдеу оңай, таза мәдениетті оқшаулауды қажет етпейді және аз уақытты қажет етеді. Бұл жұқпалы ауруларды жылдам диагностикалау үшін таптырмас.
Тәжірибеде бұл серологиялық реакциялар екі түрге бөлінеді: тікелей және жанама.
Тікелей RIF мына жерден шығарыладыантиген, ол флуоресцентті сарысумен алдын ала өңделеді. Ал жанама – алдымен дәріні қызықтыратын антиденелер үшін антигендері бар кәдімгі диагностикуммен өңдейді, содан кейін АГ-АТ кешенінің белоктарына тән люминесцентті сарысуды қайта жағып, микроб жасушалары. микроскопияда көрінетін болады.
